图 1 固相亚磷酰胺法从头合成寡聚核苷酸链的 4 步反应
这 4步反应包括:(1)去保护。酸催化去除 DMT(二甲氧基三苯基甲基)基团,以便下一轮碱基(dA、 dC、 dG和 dT)添加。(2)碱基偶联。将含有 DMT保护基团护的亚磷酰胺通过四唑活化剂加到未保护的 5′ OH末端。(3)加帽。将游离的 5′ OH乙酰化,以防止进一步的链延伸所造成的单碱基缺失。(4)氧化。通过碘液将磷酸三酯氧化为磷酸盐,进入一个反应循环